消耗品を頻繁に購入する必要があるかどうかはわかりません。 実験用消耗品を頻繁に購入する場合、特に一般的な 15ml および 50ml 遠心チューブ、細胞培養ボトル、細胞培養ディッシュ、細胞培養プレート、凍結保存チューブ PCR ボード、その他の製品。 また、これらの記載のある商品は、通常の類似商品よりも高額になる場合があります。 では、これらのステートメントの意味は何であり、実験にどのように影響するのでしょうか? 買い物をするとき、どのように選択すればよいですか？ ここで簡単に紹介します。
意味
1.パイロジェン
パイロジェンとは、体内に注入された後に体温の異常な上昇を引き起こす可能性のある発熱性物質を指します。 広い意味では、発熱性物質には、細菌性発熱性物質、内因性高分子発熱性物質、内因性低分子発熱性物質、および化学的発熱性物質が含まれます。 ここでいうパイロジェンとは、主にバクテリアのパイロジェンを指し、一部の微生物やバクテリアの死体、エンドトキシンの代謝産物です。
2.酵素
酵素は中学校で習いました。 生物学的触媒として、酵素は私たちの生物のさまざまな生化学反応を効率的に触媒できます。 しかし、ほとんどの製品が酵素なしと言うとき、実際にはより正確には、すべての酵素を意味するのではなく、ヌクレアーゼを意味します. 多くのメーカーは、DNase フリーおよび RNase フリーとも書いています。 ヌクレアーゼは核酸分子を分解できます。 DNA または RNA を特異的に分解することができ、低い特異性で DNA および RNA 分子の両方に作用することもできます。
3.エンドトキシン
エンドトキシンとは、グラム陰性菌に存在する毒性物質の総称です。 さまざまなグラム陰性菌の細胞壁成分です。 細胞が割れた後に放出される毒素で、その成分はリポ多糖です。 一般に、エンドトキシンは発熱物質であると考えられています。 医薬品の製造中は一般的に許容されます。エンドトキシンが存在しない場合、パイロジェンは存在しません。 したがって、生産時には、パイロジェン試験を実施せずにエンドトキシン試験のみを実施してもよい。
影響
パイロジェンとエンドトキシンは体を刺激し、発熱を引き起こす可能性があります。 医薬品、臨床およびその他の分野では、人間の安全のために、通常、発熱物質およびエンドトキシンの量に関する要件があります。 中国薬局方では、パイロジェンとエンドトキシンの検出のための特定の方法が示されています。 分子実験室に関して言えば、ヌクレアーゼは DNA を分解できるため、標的の分子断片を分解することがあります。 例えば、PCR 実験では、ヌクレアーゼが混入していると CT 値が得られず、偽陽性の結果が生じることがあります。 したがって、吸盤や PCR などの消耗品は通常、ヌクレアーゼ フリーです。
パイロジェンとエンドトキシンの検出
以下は、薬局方におけるパイロジェンおよびエンドトキシン試験の簡単な紹介です。
1.パイロジェン試験
ウサギによる発熱物質検出方法は、中国薬局方通則第 1142 号に記載されています。健康で資格のあるウサギを使用し、ウサギに一定量の被験物質を静脈内注射し、指定された時間内にウサギの温度上昇を観察します。 試験品と接触する試験器具は無菌で発熱物質を含まないものとする。 発熱物質は、通常、乾熱滅菌（250℃、30分以上）またはその他の適切な方法によって除去されます。 試験したウサギの体温が一定時間内に一定の基準まで上昇した場合、試験品のパイロジェン試験は要件を満たしていないとみなされます。
2.エンドトキシン試験
エンドトキシン試験の前に、リムルス試験が国際的に使用されていました。 具体的な方法としては、ゲル法、測光法などがあります。 リムルス試薬は細菌のエンドトキシンと凝集してゲルや濁度の変化を生じ、この変化を測定することでエンドトキシン含有量を測定できます。 タキプレウス アメーバ ライセートは、海洋節足動物タキプレウス アメーバ ライセートの血液から抽出された一種の試薬です。 そのため、Tachypleus amebocyte lysate は世界中で大量に捕獲され殺処分されており、中国では国家第 2 級保護動物にもなっています。 現在、FDA は TAL 試薬に代わる組換え C 因子法を承認しています。 この法律は、中国薬局方の指導原則にも記載されています。
選択方法
実際、これらの概念を理解した上で選択することは難しくありません。 それは主にあなた自身のニーズに基づいています。 一般に、酵素や発熱物質を含まない消耗品が一般的であり、エンドトキシンを含まない製品は比較的少ない. 実験自体にこれらの高い要件がない場合は、通常の消耗品を使用できます。 たとえば、細胞や関連成分を遠心分離する場合は、酵素やパイロジェンを含まない遠心管を使用する方が良いですが、通常の液体遠心分離には通常の遠心管を使用できます。
また、これは多くのユーザーが抱える問題でもあります。 業者によっては遠沈管を購入する際、遠沈管を再利用できるか聞かれることがあります。 実は、この問題は状況に応じて議論されますが、遠沈管は一度使用するとある程度汚染されており、高圧蒸気滅菌でも汚染を完全に除去することはできません。実験に対するユーザー自身のニーズに依存します。
最終的な分析では、すべての製品は実験者および実験用です。 製品のために実験に影響を与えることはできませんが、実験に従って適切な製品を選択する必要があります。
BKMAM 発熱物質フリー、リボザイムフリー、エンドトキシンフリーの遠沈管、0.5mL、1.5mL、2mL、5mL、10mL、15mL、50mLからお選びいただけます。
パイロジェンフリー、リボザイムフリー、エンドトキシンフリー クライオバイアルチューブ、雌ねじ、雄ねじ、1mL、2mL、3mL、4mL、5mLからお選びいただけます。
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