株の保存に最もよく使われる方法

Feb 10, 2023

ご伝言

微生物とは、細菌、スピロヘータ、リケッチア、クラミジア、マイコプラズマ、放線菌、菌類、ウイルスなど、自然界に広く分布し肉眼では見えない、単純な構造の微小な生物群であり、単一の細胞の中に存在し、細胞群または非細胞状態。 栄養素と適切な環境を提供する条件下で、それらは一般に独立して生活し、急速に成長することができます. 微生物の死滅や汚染を防ぎ、本来の性質を基本的に安定に保ち、研究や利用を容易にするためには、菌株保存の技術が必要です。 ここでは、細菌を保存するための一般的な方法をいくつか紹介します。

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低温保存

 

この方法は、長期保存が必要なほとんどの微生物やウイルスに適しています。 超低温環境では微生物の代謝活動が停止し、一般的に温度が低いほど効果が高いという原理です。

 

保存方法

 

バクテを保存するために凍結保存チューブを使用してくださいリア、同時にグリセリン、脱脂羊粉末またはジメチルスルホキシドなどの保護剤が必要です。 バクテリアが入った冷凍保存チューブは、- 60~- 80度の冷蔵庫に入れ、冷凍保存します。

 

 

流動パラフィンの保存方法

 

流動パラフィン保存法は、酵母、バチルス、ペニシリウム、アスペルギルスなど、パラフィンを分解できない一部の細菌に適用できます。一部の細菌や真菌は、この方法による保存に適していません。 流動パラフィン法は、流動パラフィンで覆い、微生物の代謝を抑制し、細菌の老化を遅らせます。 パラフィン法は酸素が入りにくくなり、好気性菌が増殖できなくなります。 同時に培地中の水分が蒸発すると、菌が死滅しやすくなります。 パラフィン法は、培地中の水分の蒸発を防ぎ、菌の保存期間を延ばすことができます。

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保存方法

 

無菌条件下で、滅菌した流動パラフィンを新たに培養した傾斜培養液に注入し、液面を傾斜面の上部より 1cm ~ 2cm 高くし、ゴム栓を追加して固形パラフィンで密閉し、細菌を空気から隔離します。 パラフィン油を注入した菌株は、低温(4度~6度)または室温で乾燥した場所に直立して保存する必要があります。

 

凍結乾燥保存方法

 

この方法は、ほとんどの微生物の保存に適していますが、胞子を生成しない糸状菌には適していません。 フリーズドライ保存法とは、菌を低温・乾燥・無酸素状態で保存する方法です。 すなわち、菌株を低温下で急速冷凍して微生物を無傷に保ち、減圧して空気を抽出し、氷が脱水乾燥するまで昇華させ、空の状態で空気を密閉して隔離し、微生物の代謝活動を停止します。 、それを長期間保存するために。

 

保存方法

 

一定の処方に従ってアンプルチューブに保護剤を加え、次に細菌を加えて細菌懸濁液を調製する。 アンプル チューブを - 15~- 20 度まで予備冷却してから、アンプル チューブを凍結真空乾燥機で乾燥させ、アンプル チューブを密封します。 低温で光を避けて保管してください。

 

砂管保存法

 

この方法は、胞子発生放線菌、桿菌などの保存には適していますが、菌糸の発育を主たる菌類や病原菌の保存には適していません。 細かい砂を使用して乾燥した状態を作り出すと、乾燥した環境で胞子または胞子を生成し、繁殖速度を阻害し、死に強い抵抗力を持つ微生物の代謝活動を遅くすることができます。 この方法は、株の突然変異を減らし、生存期間を延ばすことができます。

 

保存方法

 

川砂や海砂を60メッシュでふるい、大きな粒子や不純物を取り除き、さらに80メッシュでふるって細かい砂を取り除きます。 鉄吸収石で鉄を吸収し、容器に入れて10%塩酸に浸します。 川砂に有機物が多い場合は、20%塩酸に浸してください。 24時間後、塩酸を取り除き、中性になるまで水道水に数回浸し、砂を焼くか乾燥させます. さらに、汚染されていない表面の下にある 10 個の汚れを 100 日間ふるいにかけ、水道水で中性になるまで洗浄し、乾燥させました。 砂に応じて均一に混合: 土壌=2:1、アンプル チューブまたは小さな試験管にサブパック、高さは約 1 cm、綿栓を差し込み、121 度で 1 時間 ~ 1.5 時間オートクレーブします。常圧3回、1日16回。 50度以下で乾燥させます(温度が高すぎないようにしてください。そうしないと、土壌有機物が高温によって分解され、株の性能に影響を与える有害物質が生成されます)。検査後の微生物の増殖。

 

次に、細菌懸濁液を準備し、細菌懸濁液を砂管に追加します。 細菌懸濁液を含む砂管を真空乾燥機に入れ、真空乾燥します。 火気でノズルを封じて溶かし、低温(4度~10度)または常温で乾燥した場所に保管し、定期的に活力や雑菌をチェックしてください。

 

 

磁器ビーズの保存方法

 

通常、菌の低温保存用に市販されている使いやすい陶製ビーズ保存管が完成しています。 磁器ビーズ保存管は通常、凍結保存管と内部保存液、磁器ビーズで構成されています。 表面に凹凸のあるポーセレンビーズをバクテリアの吸着・保持に使用。 ひずみは- 20度または- 80度で長期間保存できます。 保管時でも蘇生時でも操作が簡単です。

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保存方法

 

細菌の純粋な培養物をプレートからかき取り、培養保存管に入れ、3-4 ミカエリス濃度に大まかに設定します。 振って菌を乳化させ、保存液を洗浄し、保存管を締めて低温で凍結させます。

 

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