回答: BKMAM PCR チューブは、市場で主流の PCR 機器およびリアルタイム PCR 機器(BD、ベックマン、ワンシ PCR 機器)に適しています。
リアルタイム定量PCR、デジタルPCR、従来のPCRの比較:
デジタルPCRの概要:陰性反復の割合を測定し、絶対コピー数を決定します。
リアルタイムPCRの概要:PCR増幅が起こると測定が行われます。
従来のPCRの概要:PCRサイクルの終了時に蓄積されたPCR産物の量を測定します。
デジタルPCRは定量的ですか?
A: はい、負のRCR応答の割合はポアソン統計アルゴリズムに適合します。
リアルタイムPCRは定量的ですか?
A: はい、データはPCRの指数関数的(対数的)段階で収集され、その間PCR産物の量は核酸テンプレートの量に比例するためです。
従来のPCRは定量的ですか?
A: いいえ、しかし、ゲル上の増幅バンドの強度を既知の濃度の標準と比較すると、「半定量的」な結果が得られます。
デジタルPCRの応用:ウイルス量の絶対定量、核酸標準の絶対定量、次世代シーケンシングライブラリの絶対定量、希少対立遺伝子の検出、遺伝子発現の絶対定量、混合物濃縮および分離
リアルタイムPCRの応用:遺伝子発現定量、マイクロアレイ検証、品質管理とアッセイ検証、病原体検出
, SNPジェノタイピング, コピー数変動, マイクロRNA解析, ウイルス定量, siRNA/RNAi実験
従来のPCRの応用:DNA増幅、シーケンシング、ジェノタイピング、分子クローニング
結論:デジタルPCRの利点:参照または標準に依存する必要はなく、PCR複製の総数、阻害剤に対する高い耐性、複雑な混合物を分析する能力を増加させることによって所望の精度を達成することができる
従来のqPCRとは異なり、デジタルPCRは出現するコピー数に直線的に応答し、小さなフォールドチェンジの違いを検出することができます。
リアルタイムPCRの利点:検出のダイナミックレンジの増加、PCR後の処理不要、2倍という低い変化をカバーすることができる検出、PCRの指数関数的な段階でのデータ取得、結果として生じるアンプリコンによるレポーター蛍光シグナルの増加数に比例し、切断プローブはアンプリコンの切断の永久的な記録を提供する
従来のPCRの短所:精度が低い、感度が低い、ダイナミックレンジが小さい< 2="" logs,="" low="" resolution,="" non-automation,="" only="" differential="" analysis="" based="" on="" specifications,="" results="" not="" represented="" as="" numbers,="" insufficient="" quantification="" using="" ethidium="" bromide="" staining,="">
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マイケル・ペン
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